影响siRNA转染实验效果的因素有各种各样，或是转染时细胞密度不合适、或是转染试剂量多了、又或是siRNA浓度偏低了等等，可以说转染实验总在你意想不到的细节处或者某个小决定之后开始走向失败。其实，想要把这种失败的损失和概率降到最低，聪明的科研者一定会进行实验条件的摸索，看似花了额外的时间，但是却能有事半功倍的效果。这里，非常建议，尤其是对于首次转染的同学，请选择24孔板进行条件摸索！主要有以下理由：
1、能够摸索出最优实验条件
每个细胞都有自己的“个性”，有的增殖比较快，有的增殖比较慢，而siRNA转染试剂所要求的转染密度是一个最适范围，如毒性很低的Starvio siRNA转染试剂只需要细胞密度在30-50%即可转染，而lipo3000则要求细胞密度为70-90%。当你不确定用多少细胞数铺板才能达到转染实验所需的合适密度时，就可以用24孔板接种不同数量的细胞以摸索出最佳的细胞接种数，如分别接种3.5*104、4*104、4.5*104个细胞。这样一来，对于不同种类的细胞就可以知道哪个接种量能够在转染时达到需要的最适密度，并且如果以上接种数皆能达到转染密度，也可以比较出最优条件，即能够使转染效率达到最高的接种数。
又比如科研者可以通过24孔板设置不同的转染试剂量、siRNA浓度来摸索最适条件，虽然说明书确实只提供了一种在实验室条件下普遍能够转染出很好效果的比例，但对于不同实验，不一定是最优答案。每一个研究者都希望实验能够做出最好的效果，那这些条件的摸索是必不可少的！
2、兼顾成本与转染效率检测
大家或许疑惑为什么不能用大孔板拿来进行条件摸索呢，这方面考虑到很多实验者只是初次转染或者只是想通过小包装来试用，那么24孔板是一种能够同时兼顾成本以及转染效率检测的选择。
所谓“成本”，并不只是指在试剂和耗材上的消耗，还有研究者的精力与时间成本。可以说，做细胞实验，往往从培养细胞开始就需要花费研究者很多的时间与精力，实验试剂的开销比起做定量、核酸提取更是昂贵了许多。因此，在正式实验开始前，利用24孔板来摸索实验条件是非常明智的，不仅可以最大程度地节约试剂使用量，也不影响实验结果的检测，如RT-qPCR等。或许有同学存在疑问，24孔板培养的细胞数是否能够提取出足量的RNA进行qPCR检测？这个问题不用担心，只要是质量正常的RNA提取试剂，提取的RNA量完全可以满足qPCR检测的需要。
常常有同学在购买转染试剂小包装后直接上六孔板进行试验，不是一种可取的做法。小包装中的试剂量本来就少，用六孔板或更大的培养皿进行条件优化或实验摸索，很容易在实验成功之前就将试剂消耗完毕。既浪费了试剂，又耽搁了时间，建议待实验条件固定后，再进行较大孔板的转染实验。
总之，希望大家不要怕麻烦，成功前的每一步都不是偶然！摸索实验条件的最优解也是每个实验者必备的科研素养哦~
